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新型納米溫度計(jì)及單細(xì)胞溫度探測(cè)研究取得進(jìn)展

作者: 2015年10月13日 來(lái)源:互聯(lián)網(wǎng) 瀏覽量:
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作為一個(gè)基本物理參量,溫度與細(xì)胞的酶促反應(yīng)、信號(hào)傳導(dǎo)等代謝活動(dòng)密切相關(guān)。準(zhǔn)確探測(cè)細(xì)胞內(nèi)的溫度變化,不僅有助于深化對(duì)細(xì)胞代謝活動(dòng)規(guī)律的認(rèn)識(shí),而且也具有潛在的臨床上應(yīng)用價(jià)值。細(xì)胞尺度一般在微米量級(jí),傳統(tǒng)的
  作為一個(gè)基本物理參量,溫度與細(xì)胞的酶促反應(yīng)、信號(hào)傳導(dǎo)等代謝活動(dòng)密切相關(guān)。準(zhǔn)確探測(cè)細(xì)胞內(nèi)的溫度變化,不僅有助于深化對(duì)細(xì)胞代謝活動(dòng)規(guī)律的認(rèn)識(shí),而且也具有潛在的臨床上應(yīng)用價(jià)值。細(xì)胞尺度一般在微米量級(jí),傳統(tǒng)的手段難以實(shí)現(xiàn)對(duì)細(xì)胞內(nèi)溫度的探測(cè)。目前,細(xì)胞內(nèi)溫度探測(cè)往往借助于納米溫度計(jì)——溫敏型納米發(fā)光探針。然而,在進(jìn)行細(xì)胞內(nèi)溫度探測(cè)時(shí),現(xiàn)有納米發(fā)光探針的發(fā)光性質(zhì)除受溫度影響外,往往還受細(xì)胞內(nèi)復(fù)雜的生化環(huán)境(如:pH、離子強(qiáng)度等)影響。而細(xì)胞內(nèi)的pH、離子強(qiáng)度等生化環(huán)境在時(shí)間、空間上是高度動(dòng)態(tài)的,嚴(yán)重影響了細(xì)胞內(nèi)溫度探測(cè)的準(zhǔn)確性和可靠性。
  在前期成功構(gòu)建高效量子點(diǎn)雙光子發(fā)光探針(P-QD)基礎(chǔ)上(Sci. Rep. 5, 9908; DOI:10.1038/srep09908),中國(guó)科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所降雨強(qiáng)課題組與北京大學(xué)教授沙印林課題組繼續(xù)深入合作。研究發(fā)現(xiàn),在近生理溫度 (20-45 oC) 范圍內(nèi),P-QD的發(fā)光強(qiáng)度隨溫度升高成線性下降,并且這種變化規(guī)律不受pH、離子強(qiáng)度的影響。基于P-QD的納米溫度計(jì),檢測(cè)靈敏度高達(dá)0.43 oC;在pH 值4到11范圍內(nèi),納米溫度計(jì)的發(fā)光強(qiáng)度變化小于2%;當(dāng)溶液的離子強(qiáng)度為500 mM(遠(yuǎn)高于生理?xiàng)l件 ~100 mM)時(shí),納米溫度計(jì)的發(fā)光強(qiáng)度變化僅有2%。此外,該類納米溫度計(jì)還具有很好的可逆性,溫度在25 oC和37 oC之間交替變化100次,P-QD納米探針的發(fā)光強(qiáng)度變化小于5%。上述這些性質(zhì),結(jié)合其優(yōu)異的生物相容性,使得P-QD可以作為一種理想的細(xì)胞溫度探針。基于該類新型納米溫度計(jì),實(shí)現(xiàn)了單個(gè)、活的腫瘤細(xì)胞內(nèi)溫度變化準(zhǔn)確、靈敏探測(cè)。
  該研究成果已于10月8日在線發(fā)表在Scientific Reports上(Sci. Rep. 5, 14879; doi:10.1038/srep14879)。文章通訊作者為中科院遺傳發(fā)育所研究員降雨強(qiáng)、助理研究員韓榮成及北京大學(xué)教授沙印林。上述研究工作得到了中國(guó)科學(xué)院、國(guó)家自然科學(xué)基金委等項(xiàng)目的支持。
  圖示:a) 不同pH環(huán)境下,P-QD納米探針的實(shí)物圖(365nm照射下)及相對(duì)發(fā)光亮度對(duì)比;b) 不同離子強(qiáng)度下,P-QD納米探針的實(shí)物圖(365nm照射下)及相對(duì)發(fā)光亮度對(duì)比;c) 在25℃與37℃交替變化情況下,P-QD納米探針的發(fā)光強(qiáng)度對(duì)比;d) 在細(xì)胞裂解液中,P-QD探測(cè)溫度與熱電偶溫度計(jì)探測(cè)溫度具有很好的一致性。
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